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QPCR试剂盒定制服务
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型号/规格:
生产厂家:辰安智检
产品用途: QPCR试剂盒定制服务荧光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积,实时监测整个PCR进程,并通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。Real-time qPCR由于其操作简便,灵敏度高,重复性好等优点发展非常迅速。现在已经广泛应用于生命科学研究的各个领域,如基因的差异表达分析,SNP检测,等位基因的检测,药物开发,临床诊断,转基因研究等。

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产品说明

QPCR试剂盒定制服务
荧光定量PCR(Real-time qPCR)就是在PCR体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积,实时监测整个PCR进程,并通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。Real-time qPCR由于其操作简便,灵敏度高,重复性好等优点发展非常迅速。现在已经广泛应用于生命科学研究的各个领域,如基因的差异表达分析,SNP检测,等位基因的检测,药物开发,临床诊断,转基因研究等。
原理:
Taqman/MGB探针:
该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团,完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,释放出荧光信号。

SYBR Green:
SYBR Green是一种DNA结合染料,能非特异地掺入到双链DNA中去。在游离状态下,它不发出荧光,但一旦结合到双链DNA中以后,便可以发出荧光。在PCR反应过程中,随着循环的增加,双链DNA量增加,相应的SYBR Green荧光值增加,由此指示PCR反应运行过程。

UNG酶防污染:
UNG酶能选择性水解断裂含有dU的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键, PCR实验中最重要的污染物是PCR产物,为防止污染,以dUTP代替常规PCR反应体系中的dTTP,生成含有dUTP的DNA扩增产物,在下一PCR开始前增加50℃的保温步骤,UNG酶即可将反应体系中已有的U-DNA污染物降解,从而保证扩增结果的特异性,准确性,随后UNG酶在变性温度下被灭活。

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